ГРИБКИ ПАРАЗИТИЧЕСКИЕ

ГРИБКИ ПАРАЗИТИЧЕСКИЕ

ГРИБКИ ПАРАЗИТИЧЕСКИЕ (син. грибы паразитические) — микроорганизмы, относящиеся к бесхлорофилльным низшим растениям — грибам, являющиеся факультативными или облигатными паразитами высших растений, рыб, рептилий, птиц и млекопитающих. Термин «грибы» употребляется в биологии. Однако в медицине все грибы, которые вызывают те или иные заболевания, принято называть грибками. Заболевания, вызываемые Г. п., называются грибковыми заболеваниями, или микозами (см.). Группу Г. п., поражающих у человека и животных кожу и ее придатки — волосы, ногти (когти), объединяют под названием дерматофиты, или дерматомицеты (см.). Большинство дерматофитов является, как правило, облигатными паразитами. Другие представители Г. п. поражают внутренние органы и системы органов — дыхательную, пищеварительную, мочеполовую, ц.н.с., ретикулоэндотелиальную, а также кожу и слизистые оболочки. Большая часть представителей этой группы относится к условно патогенным, или факультативным, паразитам. Описано ок. 500 видов Г. п., но многие названия видов являются синонимами, а патогенность некоторых видов остается недоказанной.

В основе ботанической классификации грибов лежат особенности спороношений, формирующиеся в результате полового процесса, число жгутиков у подвижных форм. Различают пять основных классов грибов. Три низших класса — Chytridiomycetes, Oomycetes, Zygomycetes — характеризуются отсутствием мицелия или примитивным нечленистым (не разделенным перегородками) мицелием и наличием плодовых тел в виде спорангиев, наполненных спорами. Два высших класса отличаются развитым членистым мицелием и образованием спороношений в виде сумок с эндогенными спорами (асков) — Ascomycetesn в виде открытых образований (базидий) с экзогенными спорами — Basidiomycetes.

Г. п., которые утратили половой способ размножения или у которых он не выявлен, объединены в искусственный класс несовершенных грибов — Fungi imperfecti (син.: Deuteromycetes, Adelomycetes). Г. п.— возбудители микозов человека и животных, встречаются в классах Phycomycetes, Ascomycetes и Fungi imperfecti.

Паразитические свойства дерматофитов раньше, чем аналогичные свойства других Г. п., стали известны мед. микологам; этим и объясняются многочисленные попытки создания автономной классификации дерматофитов вне ботанической системы грибов. Первой и наиболее популярной была классификация Р. Сабуро (1910), в основу к-рой положены четыре принципа: 1) морфология дерматофитов в волосе; 2) макро- и микроскопическая характеристика культуры возбудителя; 3) выявление источника заражения (человек, животное); 4) клин, картина микоза. Учитывая отсутствие у дерматофитов полового способа размножения, Р. Сабуро относил все дерматофиты к классу несовершенных грибков сем. Dermatomycetaceae. Имея в виду три вида грибковых поражений волосистой части головы — трихофитию, микроспорию и фавус, он различал соответственно три рода дерматофитов, их возбудителей: Trichophyton, Microsporum и Achorion. В этой классификации отсутствовал род Epidermophyton — возбудитель эпидермофитии, а также возбудители кератомикозов и глубоких микозов, которые в то время были мало известны. Ведущими критериями для определения родов и видов дерматофитов по классификации Сабуро были морфология грибка в паразитической стадии и эпидемиол, характеристика заболевания, что было особенно ценно для ориентации практического врача. Несмотря на существенные недостатки, классификация Сабуро долго сохраняла свое значение; она послужила основой для построения последующих клин, классификаций в соответствии с современными данными микологии. Создавались и другие классификации, основанные на ботанических, экол., серол, и других принципах [Вийемен (P. Vuillemin, 1910); Кастеллани (A. Castellani, 1923); Ота, Ланжерон (М. Ota, М. Langeron, 1923); Григораки и Гийяр (L. Grigoraki, J. Guiart, 1928); Брунс и Александер (C.Bruhns, A. Alexander, 1928); Эммонс (С. Emmons, 1934); И. С. Попов (1941); А. М. Кричевский (1941); Д. Л. Воронов (1946); Милошевич, Ванбрейзегем (S. Milochevitch, R. Vanbreuseghem, 1952) и др.]. Все эти классификации освещали какой-либо один признак дерматофитов и потому не удовлетворяли интересам мед. микологов и практически не использовались. Однако ботаническое направление все глубже внедрялось в мед. микологию. Применение специальных методов выращивания позволило выявить у многих дерматофитов совершенные формы спороношения, возникающие в результате полового процесса, что доказывало филогенетическую связь дерматофитов с высшими грибами. Но совершенные формы оказались у многих видов непатогенными. По типу совершенного спороношения дерматофиты относят к классу Ascomycetes, сем. Gymnoascaceae, роду Ctenomyces, а их несовершенные патогенные формы — по-прежнему к классу Fungi imperfecti, где они объединены в специальные классификации дерматофитов. Наибольшее признание получила классификация Георга (L. Georg), предложенная на XI Международном конгрессе дерматологов в 1957 г. Эта классификация включает три рода — Trichophyton, Microsporum, Epidermophyton, в которых виды объединены по ботаническому (культуральному) признаку. Поэтому в род Trichophyton оказались включенными возбудители не только трихофитии (см.), но и микроспории (см.), фавуса (см.), эпидермофитии (см.), руброфитии (см.). Так, соответственно новому таксономическому положению, Microsporum ferrugineum, М. equinum стали называть Trichophyton ferrugineum, Т. equinum; Achorion schonleinii, A. quinckeanum, A. gallinae получили название Trichophyton schonleinii, T. quinckeanum, T. gallinae; Epidermophyton rubrum — Trichophyton rubrum; Epidermophyton Kaufmann —Wolf получил название Trichophyton interdigit ale, в дальнейшем — T. mentagrophytes.

Грибки паразитические. 1 — пробирка с чистым агаром (для сравнения); 2 — Aspergillus; 3 — Blastomyces dermatitidis; 4 — Candida; 5 — Cephalosporium; 6 — Coccidioides immitis; 7 — Cryptococcus neoformans; 8 — Epidermophyton floccosum; 9 — Geotrichum; 10 — Histoplasma capsulatum; 11 — Microsporum audouinii; 12 — Microsporum canis; 13 — Microsporum distortum; 14 — Microsporum ferrugineum; 15 — Microsporum gypseum; 16 — Mucor; 17 — Penicillium. В правом верхнем углу пробирки — микроскопия культуры (схема).

Грибки паразитические. 18 — Phialophora; 19 — Scopulariopsis; 20 и 21 — Sporotrichum; 22 — Trichosporon beigelii; 23 — Trichophyton concentriciim; 24 — Trichophyton gallinae; 25 — Trichophyton megninii; 26 — Trichophyton mentagrophytes; 27 — Trichophyton mentagrophytes (var. interdigitale); 28 — Trichophyton quinckeanum; 29 — Trichophyton rubrum; 30 — Trichophyton Schonleinii; 31 — Trichophyton tonsurans; 32 — Trichophyton verrucosum (album); 33 — Trichophyton verrucosum (discoides); 34 — Trichophyton violaceum. В правом верхнем углу пробирки — микроскопия культуры (схема).

Выявляя совершенные формы дерматофитов, авторы дают им нередко новые названия, причем разные авторы присваивают различные названия одному и тому же виду. Напр., Нанницци (A. Nannizzi, 1927) назвал совершенную форму Microsporum gypseum— Gymnoascus gypseus, а Стокдейл (P. Stockdale, 1963)— Nannizzia incurvata и т. п. По два названия и более оказалось у совершенных и несовершенных форм одних и тех же видов. В связи с обилием синонимов было принято решение обозначать виды дерматофитов названием, предложенным первым автором. Так, название Trichophyton gypseum было заменено названием Trichophyton mentagrophytes, к-рое дал этому дерматофиту впервые описавший его Робен (Ch. Robin, 1853); причем под этим названием объединены два близких ботанически, но различных по своим паразитическим свойствам дерматофита — Trichophyton gypseum и Epidermophyton Kaufmann — Wolf. Дерматофиту Microsporum lanosum возвращено его первое название— М. canis; Trichophyton faviforme теперь вновь обозначают первым его названием — Т. verrucosum; Epidermophyton inguinale — E. floccosum и т. д. Все эти изменения осложнили классификацию и номенклатуру дерматофитов; классификация, к-рая отвечала бы таксономическим правилам и удовлетворяла интересы мед. микологов, еще не разработана. Г. п., известные обычно как сапрофиты и проявляющие паразитические свойства лишь в особых условиях макроорганизма и окружающей среды, занимают соответствующее место в естественной ботанической классификации грибов (цветн. рис. 1—34). Грибки родов Candida, Geotrichum, Cryptococcus — возбудители (соответственно) кандидоза (см.), геотрихоза (см. Плесневые микозы) и криптококкоза (см.), не имеющие полового способа размножения, относятся к классу Fungi imperfecti, порядку Cryptococcales, сем. Cryptococcaceae. Возбудители плесневых микозов из родов Aspergillus, Penicillium входят в класс высших грибов Ascomycetes, порядок Plectascales, сем. Aspergillaceae. Виды Г. п., входящие в этот же род, но утратившие половой способ воспроизведения, относятся к классу Fungi imperfecti, порядку Hyphomycetales. Возбудители мукормикоза, или фикомикоза, входят в класс низших грибов Phycomycetes, сем. Mucoraсеае. Таксономическое положение возбудителей некоторых глубоких микозов (см. Бластомикозы)— гистоплазмоза, кокцидиоидомикоза, бластомикоза Гилкриста (Histoplasma capsulatum, Coccidioides immitis, Blastomyces dermatitidis) и др.— нельзя считать изученным, и по этому вопросу существуют разные, нередко противоречивые мнения. Актиномицеты (см.), среди которых имеются возбудители актиномикоза, эритразмы, подмышечного трихонокардиоза, рассматриваются в разделе Г. п. условно, т. к., по современным представлениям, они не относятся к грибкам и вызываемые ими заболевания лишь по традиции остаются в рамках мед. микологии.

Содержание

Биология

Клетки Г. п. одеты твердой оболочкой, состоящей из углеводов, близких по хим. составу к целлюлозе, содержат азотистые вещества, сходные с хитином насекомых. Поверхность клеточной оболочки может быть гладкой, шиповатой, бугристой и пр., бесцветной или окрашенной в коричневатый, зеленый, желтый и другие цвета. Протоплазма в молодых клетках гомогенна, в старых— вакуолизирована и расположена обычно пристеночно. Ядра клеток выявляются только при специальных методах окраски; в одной клетке содержится несколько ядер. Из запасных веществ в протоплазме клеток откладываются гликоген, волютин, капли масла, различные по окраске и хим. составу пигменты, из которых водорастворимые окрашивают окружающую среду в соответствующий цвет, а также кристаллы щавелевой, лимонной и других к-т.

Как бесхлорофилльные растения Г. п. не способны синтезировать органические вещества из неорганических. Строение тела грибков, в т. ч. и Г. п., обеспечивает большую поверхность, через к-рую происходит осмотическое всасывание органических соединений. Вегетативное тело грибков состоит из нитей (гифов), сплетения которых образуют грибницу (мицелий). Внутрь гифы врастают перегородки, которые делят нить на отдельные клетки. В перегородке остается небольшое отверстие, обеспечивающее общий обмен во всей нити. Мицелий, не имеющий перегородок (у низших грибов), по существу представляет собой одну гигантскую клетку с множеством ядер; он называется нечленистым, или несептированным. Мицелий с перегородками (у высших грибов) называют членистым, или септированным. Различают мицелий субстратный, врастающий в среду, через который происходит всасывание питательных веществ, и воздушный, развивающийся над субстратом, несущий половые и бесполые органы размножения.

Ввиду того что длительное время совершенные формы у дерматофитов были неизвестны, их идентификация производилась по характеру мицелия и вегетативным спороношениям. Поэтому в мед. микологии накопилось много условных, практических, ботанически не научных терминов, которые, однако, сохраняют свое значение в определении видов дерматофитов. Так, древовидное ветвление нитей мицелия с расширениями на концах называют «рогами оленя», «канделябрами», «заячьими ушками» (дерматофит Trichophyton schonleinii); спирально закрученные нити —«спиралями» (дерматофит Т. mentagrophytes); ветвление на одной стороне нити, напоминающее гребешок,— «гребешковыми органами» (Microsporum canis, М. equinum); придается значение ветвлению под прямым углом (Trichophyton violaceum). В молодых культурах М. canis, Т. mentagrophytes встречаются нити, как бы завязанные узлом —«узловатые органы», которые рассматривают как рудименты совершенного плодового тела — перитеция.

Хотя мицелий Г. п. является их соматическим телом, он выполняет также функции размножения, распадаясь на отдельные клетки, каждая из которых может дать начало новой особи. По способу образования спор различают: артроспоры, образующиеся в результате деления нити мицелия на равные клетки; оидии, развивающиеся на конце нити в виде цепочек; хламидоспоры, образующиеся путем расширения нити мицелия на ее протяжении (интеркалярные) или на конце (терминальные), куда стекает протоплазма из ближайших участков. Хламидоспоры покрыты толстой оболочкой, предохраняющей протоплазму от неблагоприятных внешних воздействий, что способствует сохранению вида.

Более разнообразны и характерны органы полового и бесполого размножения. У Г. п. встречаются оба вида размножения, причем половой намного реже, чем бесполый. Принципиальное различие между этими способами размножения состоит в том, что слияние двух разноименных клеток (мужской и женской) обеспечивает новые комбинации наследственных признаков, тогда как при вегетативном размножении наследственные признаки остаются неизменными.

У представителей класса Phycomycetes половое воспроизведение осуществляется слиянием концов нитей двух различных мицелиев, и в результате образуется зигота — округлое шиповатое образование, висящее на двух образующих его нитях. Из зиготы после периода покоя вырастает спорангиеносец, имеющий на конце шаровидное образование — спорангий, наполненный спорами. У представителей класса Ascomycetes конечным продуктом слияния мужской и женской клеток является сумка (аск) сильно вытянутой овальной, булавовидной или круглой формы, в к-рой содержится 4 или 8 спор. У некоторых видов сумки образуются прямо на мицелии, у других — в специальных плодовых телах — клейстокарпиях, перитециях (см. Аскомицеты). У видов, размножающихся половым путем, могут быть также и вегетативные органы размножения. Так, у представителей фикомицетов спорангии на спорангиеносцах могут развиваться и бесполым путем — в виде воздушных выростов на субстратном мицелии. У аскомицетов бесполое размножение обеспечивается экзогенными спорами (конидиями), развивающимися на воздушной части мицелия. Морфология конидий очень разнообразна и в сочетании с другими признаками является критерием в определении видов. Конидии могут быть одноклеточными и многоклеточными, располагаются они непосредственно на мицелии или на более или менее длинной ножке—конидиеносце. Конидиеносцы на концах могут ветвиться, образуя кисточки, от которых отходят конидии в виде цепочек (Penicillium), или на концах конидиеносцев образуется вздутие разной формы (булавовидное, грушевидное, цилиндрическое и др.), с поверхности к-рого во всех направлениях отходят цепочки конидий (см. Aspergillus). Многоклеточные конидии имеют обы чно размеры до 50—70 мкм, удлиненную форму — веретенообразную, серповидную, банановидную и др. и разделяются поперечными перегородками на несколько камер, каждая из которых может дать начало росту мицелия. У дерматофитов одноклеточным конидиям соответствуют микроконидии, или алейрии, образующиеся путем выпячивания боковых стенок мицелия в виде листочков на веточке или колоска. На их построение расходуется протоплазма образующей их нити. Конидии могут быть грушевидными, круглыми, палочковидными или овальными, что является видовым признаком. Понятию «многоклеточные конидии» у дерматофитов соответствуют понятия «макроконидии», или «веретена». У дрожжеподобных грибков имеется своеобразный вид вегетативного размножения путем почкования. От материнской клетки отпочковываются 1—2—3—4 дочерние клетки и более. Число отпочковывающихся клеток и их расположение на материнской клетке (супротивное, перекрестное и пр.) являются иногда определяющим признаком вида. У дрожжеподобных грибков клетки, отпочковывающиеся в местах сочленения мицелия, называются бластоспорами. Грибковые организмы, размножающиеся почкованием, называют бластомицетами.

Паразитизм приводит, как правило, к упрощению формы Г. п., которые в тканях хозяина часто представлены только нитями мицелия и образованиями, условно называемыми спорами,— споры образуются в результате распада нитей, или дрожжевидными клетками (дерматофиты, аспергиллы, пенициллы, мукор, цефалоспориум и др.). Но если развитие плесневого Г. п. происходит в открытых полостях, сообщающихся v с воздушной средой (слуховой проход, бронх, дренируемая легочная полость), то аспергиллы, пенициллы, мукор могут образовывать в воздушной части мицелия характерные для них конидиальные спороношения. У некоторых Г. п., относящихся к диморфным грибкам, тканевая форма не может считаться упрощенной, хотя существенно отличается от сапрофитической (Histoplasma capsulatum, Coccidioides immitis). Дрожжеподобные грибки Candida и Cryptococcus neoformans существенно не изменяют своей морфологии в зависимости от способа существования.

Краткую характеристику основных видов паразитических грибков — см. таблицу.

Для питания Г. п. необходимы белки, углеводы, минеральные вещества, некоторые витамины. Характер питания, а также паразитические свойства определяются набором ферментов, присущих данному виду. Г. п. обладают протеолитическими, гликолитическими, карболитическими, липолитическими, кератолитическими и другими ферментами. Кератолитические ферменты особенно характерны для дерматофитов, ибо они обусловливают их паразитизм в роговых субстанциях кожи и ее придатках — волосах, ногтях. Преобладание протеолитических ферментов, а у некоторых видов и гиалуронидазы обеспечивает внедрение грибков в кожу, подкожную клетчатку, мышцы, внутренние органы. Развиваясь на влажных или промокших кормах (сене, соломе, зерне) или на пищевых продуктах (муке, рисе, арахисе и др.), некоторые Г. п. (аспергиллы, пенициллы, мукор) вырабатывают как один из продуктов метаболизма высокоядовитые для человека и животных вещества — микотоксины (см.), афлатоксины (см.). При употреблении в пищу этих продуктов или кормов возникают тяжелые отравления — микотоксикозы. Некоторые афлатоксины обладают канцерогенными свойствами.

Все Г. п.— аэробы (см.), но многие из них, паразитируя в тканях макроорганизма, приспосабливаются к микроаэрофильным условиям. Большинство Г. п. хорошо развивается при слабощелочной (pH 7,2— 7,4) или слабокислой (pH 6,7—6,8) реакции среды; но многие из них могут развиваться и при колебаниях pH среды в пределах от 2 до 12. Температурный оптимум для большинства Г. п. 20—30 °, виды с выраженной патогенностью растут и при t° 37 °. Среди плесеней встречаются термофилы, выдерживающие температуру до 55 °.

Все Г. п., за исключением дерматофитов, являются сапрофитами (см.) и переходят к паразитическому образу жизни относительно редко. Экспериментально установлено, что у многих видов Г. п., выделенных из природных субстратов, напр. Sporotrichum, Phialophora, Monosporium, при инокуляции животным патогенные свойства выражены слабо или вовсе не проявляются. Этим объясняется тот факт, что, несмотря на широкое распространение в природе, вызываемые ими заболевания встречаются сравнительно редко. Однако среди сапрофитов встречаются высокопатогенные виды, вызывающие уже при первой инокуляции животным тяжелые клин, проявления соответствующего микоза (Histoplasma capsulatum, Coccidioides immitis, Blastomyces dermatitidis, Paracoccidioides brasiliensis).

Условия перехода Г. п. из сапрофитического состояния в паразитическое недостаточно изучены. Доказана роль различного рода травм кожи и слизистых оболочек, мацерации кожи в патогенезе инфекций. Климатические условия — влажность и высокая температура — способствуют возникновению, иногда более тяжелому течению микозов. Важнейшее значение имеют снижение реактивности, сопротивляемости организма, падение его иммуно-защитных сил в результате перенесенных заболеваний, различного рода нарушения обмена, особенно углеводного, заболевания эндокринной системы, ц. н. с., авитаминоз. Антибиотики, особенно широкого спектра антибактериального действия, могут привести к дисбактериозу (см.), на фоне к-рого развиваются нечувствительные к этим антибиотикам Г. п. Кортикостероидные гормоны, цитостатические препараты, подавляя воспалительные, защитные реакции, снижая иммунитет, могут способствовать возникновению и развитию грибковых инфекций.

Аспергиллы и пенициллы распространены гл. обр. в почве. Развиваются эти Г. п. на хлебе, сыре, варенье и др., их споры попадают в воздух и нередко являются причиной аллергических заболеваний, в частности бронхиальной астмы.

Дрожжеподобные грибки родов Candida и Geotrichum нуждаются для своего развития в углеводистых соединениях и встречаются в почве преимущественно вблизи человеческих жилищ, а также на сладких фруктах и овощах. Cryptococcus neoformans выделен из почвы и из помета голубей, воробьев, канареек, фазанов во многих странах. Голубиный помет считают важным местом обитания этого грибка. Candida, Geo trichum и многие плесени входят в состав нормальной микробной флоры человека и животных и постоянно находятся на коже и слизистых оболочках полости рта, дыхательных путей и пищеварительного тракта. Поэтому инфекция этими Г. п. возникает часто эндогенным путем.

Распространение некоторых Г. п. ограничено определенными эндемическими зонами. Так, Coccidioides immitis встречается гл. обр. в Калифорнии, Аризоне, Техасе (США), в Южной Америке, причем в местностях, где периоды дождей сменяются засухой. Но и в почвах этих зон С. immitis распространен неравномерно. В увлажненной почве он вегетирует, увеличивает свою массу, распадается на артроспоры, которые в засушливый период года токами .воздуха поднимаются вверх и попадают в легкие людей и животных. Эндемические зоны гистоплазмоза (см.) расположены в бассейнах рек Огайо, Миссисипи, Миссури (США), Южной и Центральной Америке, в Африке и Азии. Histoplasma capsulatum встречается преимущественно в красных подзолистых почвах и почвах, унавоженных пометом птиц, причем сами птицы гистоплазмозом не болеют. Летучие мыши и мелкие грызуны поддерживают эту грибковую инфекций в природе. Возбудители споротрихоза (см.)— Sporotrichum, хромомикоза (см.)— Phialophora, цефалоспориоза — Cephalosporium относятся к постоянным обитателям почвы, встречаются и на растениях, куда заносятся с пылью. Эти Г. п. распространены в разных климатических зонах, но вызываемые ими заболевания чаще встречаются в тропических и субтропических странах. Со времен Р. Сабуро делались попытки обнаружения дерматофитов в природе. Предложенная Ванбрейзегемом (R. Vanbreuseghem, 1952) методика выделения кератинофильных грибков из почвы позволила установить, однако, что только Microsporum gypseum регулярно и повсеместно выделяется из 70—80% исследованных почв. Вместе с тем микоз, вызываемый этим дерматофитом, регистрируется крайне редко. Отдельным исследователям удалось выделить из почвы единичные штаммы Т. mentagrophytes, Т. verrucosum, Т. rubrum, М. canis и др., но при этом не было отмечено ни численного, ни географического совпадения этих находок с заболеваемостью людей -соответствующими дерматомикоза-ми в данной местности. С другой стороны, экспериментально установлено, что в почвах распространено большое количество антагонистов дерматофитов среди актиномицетов, нематод, клещей и бактерий. Доказано, что в нестерильной почве большинство дерматофитов сохраняет жизнеспособность от нескольких дней до нескольких месяцев. Все это свидетельствует о малой вероятности существования дерматофитов в природе. Более вероятно предположение, что различные роды и виды дерматофитов, будучи специализированными как паразиты человека и определенных видов животных, являются облигатными паразитами и их сохранность в природе поддерживается больными соответствующими микозами людьми и животными.

Лабораторные методы обнаружения и идентификации паразитических грибков

Методики культуральных исследований

Все Г. п. более или менее хорошо растут на плотной среде Сабуро (глюкозы или мальтозы 40 г, пептона 10 г, агар-агара 18—20 г, водопроводной воды 1л), на жидкой среде Сабуро (тот же состав без агара) и сусло-агаре (1 л неохмеленного пивного сусла с содержанием сахара 7—8 % по Баллингу и 20 г агар-агара). Некоторые Г. п. требуют специальных сред, на которых их специфические признаки лучше проявляются. Для плесневых грибков — среда Чапека — Докса (глюкозы или мальтозы 30 г, NaNO3 — 3 г, K2HPO4 — 1 г, MgSO4 — 0,5 г, KCl — 0,5 г, FeSO4 — 0,01 г, воды — 1 л). Для выращивания криптококка, гистоплазмы, кокцидиоидного гриба, споротрихума и др. используют мясопептонный агар с добавлением 10% дефибринированной крови человека или животных. В целях выявления филаментации (мицелия) у дрожжеподобных грибков применяют картофельную среду (20 г очищенного и натертого на терке картофеля, 1 л водопроводной воды и 10—20 г агар-агара) или рисовую (20 г риса на 1 л воды). Анаэробные формы актиномицетов выращивают в микроаэрофильных условиях на мясопептонном агаре (0,15%) с добавлением 1% глюкозы. Посев производят в глубь столбика среды и заливают стерильным вазелиновым маслом.

Идентификация культур

При определении Г. п. учитывают внешние признаки колонии (плоская, выпуклая, морщинистая, гладкая, врастающая в среду, сметанообразная), характер ее поверхности (кожистая, порошковатая, пушистая, глянцевитая), цвет (белый, фиолетовый, оранжевый, красный и пр.), цвет обратной стороны колонии (бесцветная, желтая, оранжевая, красная и пр.). При изучении микроскопической структуры колонии учитывают наличие макро- и микроконидий и характер мицелия. Для определения видов рода Candida производят биохим, исследования на способность к сбраживанию и ассимиляции сахаров (глюкозы, мальтозы, галактозы, сахарозы, лактозы), разжижению желатины, коагуляции молока, расщеплению арбутина и пр. Способность сбраживания сахаров (зимограмма) определяют на специальной среде (30 г сухих или 80 г прессованных дрожжей на 1 л водопроводной воды), к-рую делят на 5 частей и к каждой из них добавляют по 2% одного из перечисленных сахаров; в каждую пробирку помещают вверх дном стеклянный поплавок. Испытуемую культуру пересевают в 5 пробирок (по количеству сахаров); характер сбраживания определяют по количеству газа в поплавках. Для определения характера ассимиляции углеводов (ауксанограмма) к синтетической среде [(NH4)2SO4 — 0,5% , KH2PO4 — 0,1%, MgSO4 — 0,05% в дист, воде] добавляют к каждой из 5 частей этой среды по 2% одного из тех же сахаров, засевают испытуемой культурой и через 2—4 дня по интенсивности мути регистрируют степень усвоения того или иного сахара.

Реакции иммунитета

Антигенные свойства Г. п. неодинаковы. У одних (Candida, Histoplasma capsulatum, Coccidioides immitis, Blastomyces dermatitidis и др.) отчетливо выражена способность к образованию различных антител — комплементсвязывающих, агглютининов, преципитинов, что приводит к специфической иммунол. перестройке организма хозяина. У других (дерматофиты, аспергиллы, пенициллы) эта способность непостоянна и нечетко выражена. У третьих (геотрихум, криптококк) иммунол, активность не выявляется. С диагностической целью применяют реакции связывания комплемента, агглютинации, преципитации в геле (по Оухтерлоню), пассивной гемагглютинации, иммунофлюоресценции и др. Антигены типа вакцин, полисахаридные фракции, фильтраты питательной среды и др. готовят из культур соответствующих возбудителей.

Биологическую пробу на животных используют в диагностических целях, для определения патогенных свойств культур Г. п., в научно-исследовательской работе для получения моделей различных микозов и др. Инокулируют культуры Г. п., патол, материал от больных (мокроту, мочу, гной, плевральный экссудат, цереброспинальную жидкость и пр.), а также биопсированные кусочки ткани. Нестерильный материал предварительно обрабатывают в течение 1 часа р-рами антибиотиков (до 500 ЕД/мл) в количестве, соответствующем объему патол, материала.

В каждом случае используют чувствительное к данной грибковой инфекции животное. К заражению Candida, Geotrichum чувствительны кролики, белые мыши и не чувствительны морские свинки. Дерматофиты хорошо прививаются морским свинкам и кроликам и не прививаются белым мышам и крысам. Криптококк, гистоплазма, кокцидиоидный грибок изучают путем инокуляции белым мышам и золотистым хомячкам и т. д. Способ введения культуры или патол, материала определяется поставленной целью и характером инокулята — внутривенный, внутрибрюшинный, интратестикулярный, в переднюю камеру глаза, интрацеребральный и пр.

Гистологическое исследование с диагностической целью производят при разных микозах. Для исследования биопсируют кусочки тканей с язв, эрозий, стенок свищевых ходов и любых пораженных органов. Реакцию тканей на внедрение грибка определяют путем окраски гистол, препаратов гематоксилин-эозином и др., наличие грибковых элементов — окрашиванием по Граму—Вейгерту. Однако этими способами окраски не всегда удается обнаружить дрожжевидные клетки гистоплазмы; сферулы возбудителя кокцидиоидомико-за и др. Для их выявления применяют более специфические окраски— по Мак-Манусу (реактив Шиффа), Гомори—Грокотту, по А. Л. Шабадашу и др. Иногда этими способами окраски удается не только выявить возбудителя, но и определить его вид.

Источник https://xn--90aw5c.xn--c1avg/index.php/%D0%93%D0%A0%D0%98%D0%91%D0%9A%D0%98_%D0%9F%D0%90%D0%A0%D0%90%D0%97%D0%98%D0%A2%D0%98%D0%A7%D0%95%D0%A1%D0%9A%D0%98%D0%95

Источник

Источник

Источник

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *